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温度胁迫研究NMT标准化方案

温度胁迫研究NMT标准化方案

 

一、视频资源

二、参考文献

C2019-028,种康,中国科院植物所植物分子生理学重点实验室,J of integr plant biol ,水稻,根,Ca2+
OsCIPK7 point-mutation leads to conformation and kinase-activity change for sensing cold response

C2019-029,李衍素、于贤昌,中国农业科学院蔬菜与花卉研究所,BMC Plant Biol,根毛区,NO3-、NH4+

24-Epibrassinolide promotes NO3- andNH4+ ion flux rate and NRT1 gene expression in cucumber under suboptimal root zone temperature

 

C2016-001,陈少良,北京林业大学,PLANT CELL TISS ORG,悬浮细胞,Ca2+/K+

Heat shock responses in Populus euphratica cell cultures important role of crosstalk among hydrogen peroxide, calcium and potassium

 

C2015-005,种康,中科院植物所,Cell,根,Ca2+

COLD1 Confers Chilling Tolerance in Rice

三、常测哪些指标

Ca2+、H+

四、检测这些离子流、分子流,有什么生物学意义

  • 1)Ca2+生理功能概述

    2)科研案例

    冷胁迫时COLD1与G蛋白α亚基相互作用激活Ca2+通道,触发下游耐寒的防御反应,而后加速G蛋白GTP酶活性,最终揭示了通过驯化得到的COLD1等位基因和特异SNP赋予水稻耐寒性的新机制。研究利用NMT检测了不同水稻品种在低温胁迫下Ca2+的流速,为水稻冷胁迫下Ca2+通道的激活提供了直接的依据。

    Ma Y, et al. COLD1 Confers Chilling Tolerance in Rice. Cell., 2015,160(6):1209-21.

     

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  • 1)H+生理功能概述

    2)科研案例

    对云杉和冷杉这两种针叶树种进行了一年四季持续的夜间增温,以研究秋季根系和叶片的形态和生理响应。结果表明,夜间增温显著增加了云杉的净H+外排。结合的检测结果、光合、生长特性和其他离子通量的实验结果,表明,夜间增温可提高晚秋叶片光合速率,增加根系对氮的吸收能力。

     

    ganhanxiepo5

     

五、可以检测哪些样品

点击查看具体信息

点击查看样品照片

 

1、动物样品

1)细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2)组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)

3)其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓

2、植物样品

1)营养器官

根:根毛、根瘤*

茎:边材、心材、微管形成层、木质部

叶:表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉

种子:整体、胚

果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃

3)细胞:植物悬浮细胞、液泡

4)愈伤组织

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)

4、其它生物样品

周丛生物

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料

六、样品需要做哪些前处理

国际领先的非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

1、动物单细胞

因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可。

2、动物组织

因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。

6、植物花粉管

离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部位即可。

8、植物悬浮细胞

无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。

七、 实验时有哪些检测方式?

1、实时处理 /瞬时处理后检测

即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。

2、预处理/提前处理好后检测

是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。

八、检测环境是空气还是溶液

检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。

九、 样品是如何检测的?

十、可以送样检测吗

可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。点击获取测试服务

Ceshifuwuwangluo

十一、 哪里能获取非损伤微测系统操作培训服务

请直接联系旭月公司获取设备操作培训服务。点击此处查看培训服务介绍

联系人:巨肖宇

电话:010-8262 2628按3

十二、如何购买实验耗材(自行检测)

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