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显微镜下观察斑马鱼心脏跳动

 

 

 

显微镜下观察斑马鱼皮肤离子细胞

 

 

 

斑马鱼侧线迁移

 

 

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参考文献

 

1）Potassium Regulation in Medaka (Oryzias latipes) Larvae Acclimated to Fresh Water: Passive Uptake and Active Secretion by the Skin Cells

2）Functional regulation of H⁺-ATPase-rich cells in zebrafish embryos acclimated to an acidic environment

3）Aquaporin 1 Is Involved in Acid Secretion by Ionocytes of Zebrafish Embryos through Facilitating CO₂ Transport

4）Induction of Phosphoenolpyruvate Carboxykinase(PEPCK) during Acute Acidosis and Its Role in Acid Secretion by V-ATPase-Expressing Ionocytes

5）Proton-facilitated ammonia excretion by ionocytes of medaka (Oryzias latipes)acclimated to seawater

6）Acid secretion by mitochondrion-rich cells of medaka (Oryzias latipes) acclimated to acidic freshwater

 

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常测哪些指标

 

H⁺、NH₄⁺、Ca²⁺、Na⁺、K⁺

 

 

检测这些离子流、分子流，有什么生物学意义

 

1）NH₄⁺生理功能概述

 

 

 

2）科研案例
      对斑马鱼幼体皮肤上特定细胞的H⁺和NH₄⁺外排通量进行了测定。在富含H⁺泵的细胞中NH₄⁺的外排量相对较高，被认为是斑马鱼分泌H⁺的离子细胞。幼虫皮肤角质形成细胞和其他类型的离子细胞也有少量NH₄⁺外排。从皮肤中排出的NH₄⁺与酸分泌密切相关。本研究证实了幼虫皮肤上皮细胞的排氨是通过酸捕获机制进行的，这为H⁺泵和Rh糖蛋白（Rhcg1）参与排氨提供了直接证据。

Shih TH, Horng JL, Hwang PP, Lin LY. Ammonia excretion by the skin of zebrafish (Danio rerio) larvae. Am J Physiol Cell Physiol. 2008;295(6):C1625-C1632.

 

 

 

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可以检测哪些样品

 

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1、动物样品

1）细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2）组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑（海马体等）、胚胎（大鼠、鱼）、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏（香螺）、卵（鱼、鸡蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉组织（肌纤维、心肌）

3）其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫（果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽）、蝌蚪、水蛭、蓝蟹（微感毛）、变形虫、水丝蚓

2、植物样品

1）营养器官

根：根、根毛、根瘤*

茎：边材、心材、微管形成层、木质部

叶：表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2）生殖器官

花：花瓣、花瓣表皮细胞、花粉

种子：整体、胚

果实：果壳、果皮、果肉（苹果、柑橘）、籽粒、棉花纤维、棉桃

3）细胞：植物悬浮细胞、液泡

4）愈伤组织

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌（大肠杆菌）

4、其它生物样品

周丛生物

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材

 

 

样品需要做哪些前处理

 

国际领先的非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测，因此动植物材料在检测前，不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

1、动物单细胞

因NMT是活体检测，故从培养箱中拿出来后，置于培养皿中，直接检测即可。

2、动物组织

因NMT是活体检测，无需提前处理。如检测部位天然暴露在外，如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞，直接检测即可。如检测部位位于体内，需在检测时暴露出检测部位（可采用麻醉的方式），后检测即可。

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官，例如根、茎、叶的表面，无需任何处理，直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测，检测时不接触样品，故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中，提取出来后检测。

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部，故检测时采用撕取等方式，暴露出相应细胞即可。

6、植物花粉管

离体萌发：在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测；在体萌发：将柱头置于培养皿中，待萌发一段时间后即可直接检测。

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部，需在检测前暴露出相应部位即可。

8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时，置于培养皿中检测即可。

 

 

有哪些检测方式

 

1、实时处理/瞬时处理后检测

 

即瞬时处理，是指在检测过程中，在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的处理方法，目的是为了观察瞬间干旱胁迫下，样品短时间内的离子/分子的变化趋势，即短时效应。

2、预处理/提前处理好后检测

是指在干旱胁迫一段较长的时间后（数十分钟/数小时/数天），观察植物离子/分子进出的情况，即长时效应。

 

 

检测环境是空气还是溶液

 

检测时，只要求待测部位浸于溶液中（无需整体都浸在溶液里）。

 

 

样品是如何检测的

 

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可以送样检测吗

 

可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理，由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心，提供检测服务。

 

 

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哪里能获取非损伤微测系统操作培训服务

 

请直接联系旭月公司获取设备操作培训服务。

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联系人：巨肖宇

电话：010-8262 2628按3

 

 

如何购买实验耗材（自行检测）

 

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关键词：斑马鱼、NMT、标准化方案