植物钙信号研究NMT标准化方案丨中关村认证实验标准
01 视频资源
NMT专家北大应用报告之钙信号(31分58秒)
https://v.qq.com/x/page/p3049k52ibe.html
专家讲座:NMT瞬时捕捉钙离子信号
https://v.qq.com/x/page/g0899e4o0yq.html
根系钙镁离子流同时检测丨NMT实验奇想(第22期)
https://v.qq.com/x/page/m3040lnjfiv.html
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02 参考文献
1)C2015-005,种康,中科院植物所,Cell,根,Ca2+
COLD1 Confers Chilling Tolerance in Rice
2)C2018-026,张国平,浙江大学农学系,浙江省作物种质资源重点实验室,Plant Cell Physiol ,大麦,根部成熟区,K+、Ca2+、H+
A Sodium Transporter HvHKT1;1 Confers Salt Tolerance in Barley via Regulating Tissue and Cell Ion Homeostasis
3)C2019-002,孙健、李宗芸,江苏师范大学,J Exp Bot ,甘薯,根,K+、H+、Ca2+、Na+
Root-zone-specific sensitivity of K+-and Ca2+-permeable channels to H2O2 determines ion homeostasis in salinized diploid and hexaploid Ipomoea trifida
4)C2019-020,李召虎,中国农业大学,New phytol,棉花、拟南芥,根,Ca2+、K+、Na+
Phosphatase GhDsPTP3a interacts with annexin protein GhANN8b to reversely regulate salt tolerance in cotton (Gossypium spp.)
5)C2019-033,杨润强,南京农业大学,Food and Chem Toxicol,大麦,Ca2+
Ca2+ involved in GABA signal transduction for phenolics accumulation in germinated hulless barley under NaCl stress
6)F2018-001,Science,花粉管,Ca2+
CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis
7)C2014-010,孙蒙祥,武汉大学,J EXP BOT,花粉管,Ca2+
Exogenous γ-aminobutyric acid affects pollen tube growth via modulating putative Ca2+-permeable membrane channels and is coupled to negative regulation on glutamate decarboxylase
8)C2014-006,宋纯鹏,河南大学,Plant Cell,根毛/液泡,NH4+/Ca2+
A Receptor-Like Kinase Mediates Ammonium Homeostasis and Is Important for the Polar Growth of Root Hairs in Arabidopsis
9)C2014-003,张献龙/涂礼莉,华中农业大学,New Phytologist,纤维细胞,Ca2+
The calcium sensor GhCaM7 promotes cotton fiber elongation by modulating reactive oxygen species (ROS) production
10)C2012-010,Plant Physiology,陈少良,北京林业大学,根/真菌团,Na+/K+/H+/Ca2+
Paxillus involutus strains MAJ and NAU mediate K+/Na+homeostasis in ectomycorrhizal Populus × canescens under NaCl stress
11)F2011-014,PLANT CELL ENVIRON ,叶肉细胞,Ca2+/ K+
Plasma membrane Ca2+ transporters mediate virus-induced acquired resistance to oxidative stress
12)F2008-004,Plant Cell Physiology,叶肉细胞,Ca2+
Calcium Efflux as a Component of the Hypersensitive Response of Nicotiana benthamiana to Pseudomonas syringae
13)C2019-019,陈仲华,浙江大学,Proc natl acad sci,拟南芥,保卫细胞,K+、Ca2+、Cl-
Evolution of chloroplast retrograde signaling facilitates green plant adaptation to land
14)C2018-056,张建华、刘鹰高,香港中文大学、山东农业大学,Plant journal,水稻,胚芽鞘,Ca2+
Natural variation in the promoter of rice calcineurin B‐like protein10 (Os CBL 10) affects flooding tolerance during seed germination among rice subspecies
15)C2015-001,罗志斌,西北农林科技大学,New Phytologist,根,Ca2+/Cd2+/H+
Overexpression of bacterial gamma-glutamylcysteine synthetase mediates changes in cadmium influx, allocation and detoxification in poplar
16)C2012-009,赵福庚,南京大学,PLANT CELL ENVIRON ,根,K+/Ca2+
Cadmium impairs ion homeostasis by altering K+ and Ca2+ channel activities in rice root hair cells
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03 常测哪些指标
Ca2+
04 检测这些离子流、分子流,有什么生物学意义
1)Ca2+生理功能概述
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2)科研案例
1)案例1
为了研究Ca2+在NaCl胁迫下大麦幼苗中酚类物质积累的GABA信号转导中的作用,用外源GABA及其合成抑制剂3-巯基丙酸(3-MP)等试剂处理幼苗。结果表明,GABA诱导大麦根尖细胞内的Ca2+流入,并改变Ca2+的分布,使钙沉淀更均匀和密集。此外,LaCl3,EGTA和2-APB处理抑制了酚类物质的积累,这种抑制作用可以通过外源性GABA部分缓解。总之,Ca2+参与了NaCl胁迫下大麦幼苗中酚类物质积累的GABA信号转导。
(Ma Y, Wang P, Gu Z, et al. Ca2+ involved in GABA signal transduction for phenolics accumulation in germinated hulless barley under NaCl stress. Food Chem X. 2019;2:100023. Published 2019 Apr 5. doi:10.1016/j.fochx.2019.100023)
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05 可以检测哪些样品
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1、动物样品
1)细胞
神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等
2)组织器官
肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)
3)其它动物样品
珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓
2、植物样品
1)营养器官
根:根、根毛、根瘤*
茎:边材、心材、微管形成层、木质部
叶:表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
2)生殖器官
花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子:整体、胚
果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃
3)细胞:植物悬浮细胞、液泡
4)愈伤组织
3、微生物样品
酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)
4、其它生物样品
周丛生物
5、非生物样品
金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料
06 样品需要做哪些前处理
非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。
1、动物单细胞
因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可。
2、动物组织
因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。
3、植物根茎叶等组织器官
天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。
4、植物原生质体/液泡
因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。
5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。
6、植物花粉管
离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。
7、植物果实
无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部位即可。
8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。
07 有哪些检测方式
1、实时处理 /瞬时处理后检测
https://v.qq.com/x/page/a051801fvjn.html
即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。
2、预处理/提前处理好后检测
是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。
08 检测环境是空气还是溶液
检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。
09 样品是如何检测的
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10 可以送样检测吗
可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。
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11 哪里能获取非损伤微测系统操作培训服务
请直接联系旭月公司获取设备操作培训服务。
联系人:巨肖宇
电话:010-8262 2628按3
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12 如何购买实验耗材(自行检测)
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关键词:NMT标准化方案、钙信号